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http://repositorio.ufla.br/jspui/handle/1/7147| Título: | Factors affecting the production and regeneration of protoplasts from Colletotrichum lindemuthianum |
| Título(s) alternativo(s): | Fatores que afetam a produção e regeneração de protoplastos de Colletotrichum lindemuthianum |
| Autor: | Ishikawa, Francine Hiromi Barcelos, Quélen de Lima Souza, Elaine Aparecida de Dias, Eustáquio Souza |
| Palavras-chave: | Protoplast formation Lytic enzyme Anthracnose Osmotic stabilizer Filamentous fungi Formação de protoplastos Enzima lítica Antracnose Estabilizador osmótico Fungo filamentoso |
| Publicador: | Editora da Universidade Federal de Lavras |
| Data: | 1-Fev-2010 |
| Referência: | ISHIKAWA, F. H. et al. Factors affecting the production and regeneration of protoplasts from Colletotrichum lindemuthianum. Ciência e Agrotecnologia, Lavras, v. 34, n. 1, p. 74-79, jan./fev. 2010. |
| Resumo: | O presente trabalho apresenta os fatores que afetam a produção e regeneração de protoplastos de Colletotrichum lindemuthianum. O isolamento de protoplastos é muito relevante para diferentes aplicações, principalmente, em procedimentos que envolvem a manipulação genética. Estabilizadores osmóticos, enzimas líticas, tempo de incubação e idade micelial foram testados com relação ao efeito na liberação de protoplastos. As condições otimizadas para produção de protoplastos foram incubação de micélio jovem (48 h) em estabilizador osmótico NaCl 0.6 mol l-1, acrescido de 30 mg ml-1 da enzima Lysing Enzymes de Trichoderma harzianum incubado, durante 3 h. Nessas condições, a obtenção de protoplastos foi maior que 106 protoplatos ml-1 na mistura de digestão, número suficientemente adequado para experimentos de transformação em fungos. Sacarose nas concentrações de 1.2 mol l-1 e 1 mol l-1 foram os estabilizadores mais apropriados para a regeneração, após 48 h, sendo as taxas de regeneração de 16.35% e 14.54%, respectivamente. Este estudo produziu um método eficiente para produção e reversão de protoplastos à morfologia micelial típica de Colletotrichum lindemuthianum utilizando o isolado LV115. |
| Abstract: | The present work reports factors affecting the production and regeneration of protoplasts from Colletotrichum lindemuthianum. The usefulness of protoplast isolation is relevant for many different applications and has been principally used in procedures involving genetic manipulation. Osmotic stabilizers, lytic enzymes, incubation time and mycelial age were evaluated in terms of their effects on protoplast yield. The optimal condition for protoplast production included the incubation of young mycelia (48 h) in 0.6 mol l-1 NaCl as the osmotic stabilizer, with 30 mg ml-1 Lysing Enzymes from Trichoderma harzianum for 3 h of incubation. In these conditions protoplasts production was higher than 10(6) protoplatos ml-1 in the digestion mixture, number suitable enough for experiments of transformation in fungi. Sucrose concentrations of 1.2 mol l-1 and 1 mol l-1 were the most suitable osmotic stabilizers for the regeneration after 48 h, with rates of 16.35% and 14.54%, respectively. This study produced an efficient method for protoplast production and reverted them into a typical mycelial morphology using a Colletotrichum lindemuthianum LV115 isolate. |
| Outras Identificações : | http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1413-70542010000100009 |
| Idioma: | en |
| Aparece nas coleções: | Ciência e Agrotecnologia DBI - Artigos publicados em periódicos |
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