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dc.creatorRabelo, Natana Gontijo-
dc.date.accessioned2021-04-05T17:28:15Z-
dc.date.available2021-04-05T17:28:15Z-
dc.date.issued2021-04-05-
dc.date.submitted2020-12-15-
dc.identifier.citationRABELO, N. G. Produção e Purificação de L-asparaginase por Aspergillus caespitosus CCDCA 11593. 2020. 77 p. Dissertação (Mestrado em Microbiologia Agrícola) – Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2021.pt_BR
dc.identifier.urihttp://repositorio.ufla.br/jspui/handle/1/46178-
dc.description.abstractThis work aimed to study the production and purification of the enzyme L-asparaginase (EC 3.5.1.1) produced by the filamentous fungus Aspergillus caespitosus, through solid and submerged fermentation processes, using alternative substrates such as ora-pro-nobis fiber (Pereskia aculeata Miller) and whey powder, respectively. A centered face design was applied in order to optimize the enzyme production. Through the solid fermentation (FES) the influence of the parameters was evaluated: fermentation time (h), inoculum concentration (spores/ml), asparagine concentration (% m/v), temperature (° C) and substrate concentration (ora-pro-nobis fiber) on the volumetric activity of L-asparaginase (U/ml). The submerged fermentation process (FSbm) evaluated the parameters: concentration of asparagine, concentration of inoculum, temperature, fermentation time, pH and concentration of substrate (whey powder) on the enzymatic activity of L-asparaginase. The results of the statistical analyzes indicated that the best condition for the production of the enzyme by solid fermentation was obtained by using an inoculum concentration of 105 spores/ml, temperature of 25 ºC, fermentation time 120 h, 14% substrate and 1% of asparagine, obtaining 2.7498 U/mL of volumetric activity. Submerged fermentation, on the other hand, presented the best result in production conditions with 10% asparagine, 6% substrate, spore concentration 107 spores/mL, temperature of 25 ºC, pH 7 and 120 hours of fermentation, with an activity of 1, 49265 U/ml. The contour graphics were chosen to better demonstrate the interactions between the parameters that were significant in both fermentation processes. The interactions between temperature and fermentation time negatively influenced the production of L-asparaginase from FES. While in the submerged fermentation the interactions between asparagine concentration and inoculum concentration, temperature and inoculum concentration, whey concentration and temperature and pH and temperature negatively affected the enzyme production. In FSbm, the interactions between the parameters inoculum concentration and pH, inoculum concentration and substrate concentration, asparagine concentration and fermentation time, inoculum concentration and asparagine concentration, inoculum concentration and temperature, temperature and substrate concentration, temperature and pH, positively affected the volumetric activity of L-asparaginase. Then, batch adsorption tests were performed to find the best condition for the purification of the selected asparaginase obtained from the optimization of the submerged fermentation. The enzyme adsorption tests were performed using an ion exchange cryogel column functionalized with 2-aminoethanesulfonic acid, using a sodium phosphate balance buffer (0.05 mol/L) at pH 3. The purified enzyme presented an activity of 4,400 U/mg, whereas the crude extract presented 2,779 U/mg. These results showed that the production of L-asparaginase from the Aspergillus caespitosus species is promising by solid and submerged fermentation processes using alternative substrates such as ora-pro-nobis leaf fiber and whey.pt_BR
dc.description.sponsorshipCoordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)pt_BR
dc.languageporpt_BR
dc.publisherUniversidade Federal de Lavraspt_BR
dc.rightsrestrictAccesspt_BR
dc.subjectFermentação sólidapt_BR
dc.subjectFermentação submersapt_BR
dc.subjectL-asparaginase - Purificaçãopt_BR
dc.subjectPurificação por troca iônicapt_BR
dc.subjectOra-pro-nóbispt_BR
dc.subjectSoro de leite em pópt_BR
dc.subjectSolid fermentationpt_BR
dc.subjectSubmerged fermentationpt_BR
dc.subjectL-asparaginase - Purificationpt_BR
dc.subjectWhey powderpt_BR
dc.subjectIon exchange purificationpt_BR
dc.subjectAspergillus caespitosuspt_BR
dc.titleProdução e Purificação de L-asparaginase por Aspergillus caespitosus CCDCA 11593pt_BR
dc.title.alternativeProduction and purification of L-asparaginase by Aspergillus caespitosus CCDCA 11593pt_BR
dc.typedissertaçãopt_BR
dc.publisher.programPrograma de Pós-Graduação em Microbiologia Agrícolapt_BR
dc.publisher.initialsUFLApt_BR
dc.publisher.countrybrasilpt_BR
dc.contributor.advisor1Dias, Disney Ribeiro-
dc.contributor.advisor-co1Veríssimo, Lizzy Ayra Alcântara-
dc.contributor.advisor-co2Fernandes, Maysa Lima Parente-
dc.contributor.referee1Bastos, Sabrina Carvalho-
dc.contributor.referee2Ramos, Cintia Lacerda-
dc.contributor.referee3Verissimo, Lizzy Ayra Alcantara-
dc.description.resumoEste trabalho teve como objetivo estudar a produção e purificação da enzima L-asparaginase (EC 3.5.1.1) produzida pelo fungo filamentoso Aspergillus caespitosus, através dos processos de fermentações sólida e submersa, utilizando substratos alternativos como fibra de ora-pro-nobis (Pereskia aculeata Miller) e soro de leite em pó, respectivamente. Um delineamento de face centrada foi aplicado com a finalidade de otimizar a produção da enzima. Por meio da fermentação sólida (FES) foi avaliado a influência dos parâmetros: tempo de fermentação (h), concentração de inóculo (esporos/ml), concentração de asparagina (% m/v), temperatura (°C) e concentração de substrato (fibra de ora-pro-nobis) sobre a atividade volumétrica de L-asparaginase (U/ml). O processo de fermentação submersa (FSbm) avaliou os parâmetros: concentração de asparagina, concentração de inóculo, temperatura, tempo de fermentação, pH e concentração de substrato (soro de leite em pó) sobre a atividade enzimática da L-asparaginase. Os resultados das análises estatísticas indicaram que a melhor condição para a produção da enzima por fermentação sólida foi obtida ao se utilizar uma concentração de inóculo de 105 esporos/ml, temperatura de 25 °C, tempo de fermentação 120 h, 14% de substrato e 1% de asparagina, obtendo 2,7498 U/mL de atividade volumétrica. Já a fermentação submersa apresentou o melhor resultado nas condições de produção com 10% de asparagina, 6% de substrato, concentração de esporos 107 esporos/mL, temperatura de 25 °C, pH 7 e 120 horas de fermentação, com uma atividade de 1,49265 U/mL. Os gráficos de contorno foram escolhidos para melhor demonstrar as interações entre os parâmetros que foram significativos em amos os processos fermentativos. As interações entre temperatura e tempo de fermentação influenciaram negativamente a produção da L-asparaginase a partir da FES. Enquanto na fermentação submersa as interações entre a concentração de asparagina e concentração de inóculo, temperatura e concentração de inóculo, concentração de soro de leite e temperatura e pH e temperatura afetaram negativamente a produção da enzima. Na FSbm, as interações entre os parâmetros, concentração de inóculo e pH, concentração de inóculo e concentração de substrato, concentração de asparagina e tempo de fermentação, concentração de inóculo e concentração de asparagina, concentração de inóculo e temperatura, temperatura e concentração de substrato, temperatura e pH, afetaram positivamente a atividade volumétrica de L-asparaginase. Em seguida, foram realizados ensaios de adsorção em batelada para encontrar a melhor condição para a purificação da selecionada-asparaginase obtida a partir da otimização da fermentação submersa. Os ensaios de adsorção da enzima foram realizados com a utilização de uma coluna de criogel de troca iônica funcionalizado com ácido 2-aminoetanossulfônico, utilizando um tampão de equilíbrio de fosfato de sódio (0,05 mol/L) em pH 3. A enzima purificada apresentou uma atividade de 4,400 U/mg, já o extrato bruto apresentou 2,779 U/mg. Estes resultados mostraram ser promissor a produção de L-asparaginase partir da espécie Aspergillus caespitosus por processos de fermentação sólida e submersa utilizando substratos alternativos como fibra das folhas do ora-pro-nobis e soro de leite.pt_BR
dc.publisher.departmentDepartamento de Biologiapt_BR
dc.subject.cnpqMicrobiologia Agrícolapt_BR
dc.creator.Latteshttp://lattes.cnpq.br/9126927534553546pt_BR
dc.contributor.advisor-co-otherSouza, Angélica Cristina-
Aparece nas coleções:Microbiologia Agrícola - Mestrado (Dissertações)

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